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I型膠原蛋白是細胞外基質(ECM)的主要結構成分。因此,這種纖維蛋白通常用于三維(3D)膠原凝膠,其比傳統的2D系統更好地模擬體內細胞環境。此外,膠原蛋白I是涂層表面的理想選擇,因為它可以形成用于培養細胞的薄層。ibidi的I型膠原蛋白是一種從鼠尾肌腱中提取的最先進的純化蛋白,沒有胃蛋白酶消化。它專為ibidi基于細胞的分析而設計(例如,3D凝膠中的趨化性分析,或實驗室培養器皿的2D涂層)。
材料
膠原蛋白是一種纖維蛋白,由三條α-鏈組成,可以組合形成繩狀三螺旋,從而為細胞外基質(ECM)提供拉伸強度。α-鏈含有GXY重復:甘氨酸
是一種適合三螺旋的氨基酸。通常,X和Y代表羥脯氨酸和脯氨酸,它們是膠原蛋白穩定性的關鍵組分。
I型是最常見的纖維狀膠原蛋白,主要存在于皮膚,骨骼,肌腱和其他結締組織中。由于酸提取和蛋白質純化,這種膠原蛋白被認為不含任何生長因子。
應用范圍
在中性pH和37℃下,I型膠原蛋白將形成3D凝膠,類似于動物細胞外基質。3D凝膠可讓您研究ECM的機械性質對細胞發育,趨化性,遷移和形態的影響。與2D系統不同,3D環境允許細胞延伸同時在背側和腹側細胞表面上利用整合素。這導致特定信號傳導途徑的激活。凝膠硬度或剛性在3D中比在2D環境中不同地影響細胞遷移。此外,由于基質原纖維與細胞延伸的纏結而產生的整聯蛋白非依賴性機械相互作用在3D系統中是可能的,但在細胞附著于平坦表面的2D系統中是不可能的。
此外,膠原蛋白I是2D環境中表面薄涂層的理想選擇。它促進2D培養中眾多細胞類型的細胞粘附。
2D和3D應用都包括腫瘤細胞侵襲,遷移和巨噬細胞和/或單核細胞趨化性的研究。
涂層介紹
確定要涂層的面積或通道的體積。
確定涂層面積A涂層 (即與流體接觸的完整區域)。
計算所需的膠原蛋白濃度:
使用,將膠原蛋白稀釋至計算濃度
517.5mM乙酸。膠原蛋白在中性pH下不溶。
填充盤子或通道。
在室溫下孵育一小時。
完全吸入通道或孔體積。
用PBS或無血清培養基小心沖洗。
井或渠道現在可以使用了??蛇x地,在室溫下風干。
儲存在無菌條件下并盡快使用。
重要信息:
由于膠原分子的剛性和長的三螺旋構象,膠原溶液的粘度極高,超過4mg / ml,并且在較高濃度下難以處理。
訂購信息
描述
50201 I型膠原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,1×5ml:非胃蛋白酶原
50202 I型膠原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,4×5ml:非胃蛋白酶原
50203 I型膠原蛋白,大鼠尾巴,5mg / ml,1×100ml:非胃蛋白酶原
50204 I型膠原蛋白,大鼠尾巴,10mg / ml,1×5ml:非胃蛋白酶原
50205 膠原蛋白I型,鼠尾,10mg / ml,4×5ml:非胃蛋白酶原
50206 I型膠原蛋白,大鼠尾巴,10mg / ml,1×100ml:非胃蛋白酶原